مناقشة طالبة دراسات عليا
جرت مناقشة الطالبة” ميس عماد احمد” – قسم علوم الحياة حول اطروحتها الموسومة “التأثيرات ضد المايكروبية والألتهابية للبكتروسينات المنتجة والمنقاة من بكتريا Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa المعزولة من العينات سريرية” على قاعة التعليم المستمر(قاعة ورشة العمل).
تضمنت الدراسة عزل البكتريا المقاومه للمضادات وانتاج البكترويسينات واستعمالها ضد الاتهابات. هدفت الدراسة إلى إنتاج البكتريوسين الخام والنقي من البكتريا المقاومة للمضادات الحيوية (بكتريا كرام موجبة مكورات عنقودية ذهبية مقاومة للميثسيلين MRSA وكرام سالبة الزائفة الزنجارية P.aeruginosa) المعزولة من عينات سريرية وتحديد الظروف المثلى لإنتاج البكتريوسين وتنقيته وتوصيفه، فضلا عن تحديد وتوصيف فعاليته التثبيطية خارج وداخل الجسم الحي
جمعت 150 عينة سريرية (حروق وجروح وادرار ومسحات الانف والاذن) من مرضى مستشفى اليرموك ومستشفى بغداد التعليمي خلال الفترة من شهر تشرين الثاني /2015 الى شهر كانون الثاني/2016. اجريت الاختبارات الزرعية والمجهرية والكيميوحياتية والتأكد من التشخيص باستخدام عدتي API20E وAPI Staph وفحص الحساسية للمضادات الحياتية وتاكيده باستخدام جهازVitek-2 وتم استعمال
التحري عن قابلية عزلات MRSA و P.aeruginosa المقاومة على إنتاج MRSAcin و MAR-pyocin باستخدام خمسة طرائق هي: الأشرطة المتقاطعة والتنقيط والانتشار بالحفر والاكار المقلوب والاقراص الورقية ضد مؤشر مسببات ممرضة. كان WDA أفضل طريقة لتحديد إنتاج البكتريوسين وفعالية المضادات البكتيرية ضد مؤشر مسببات ممرضة
تمت في هذه الدراسة أيضا تنقية البكتريوسينات تضمنت الاستخلاص بكبريات الامونيوم بنسبة 70% وتلاها الفصل بطريقة المبادل الايوني DEAE-Celluloseمن ثم كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي بأستخدام عمود (Sephadex G-50
كما استعملت المذيبات العضوية %10 (الأسيتون، الكلوروفورم والميثانول) والمنظفات (%0.5 EDTA) والأملاح المعدنية %0.5 من كل CuSo4 وFeSo4، (10٪ الإنزيمات المحللة للبروتين (%10 اللايبيز) كما إصابة تجريبية داخل الجسم الحي في جلد الفئران المختبريه
وكانت النتائج اظهرت النتائج ان 102 (68%) عزلة S.aureus وكانت جميعها MRSA وشكلت 50% من النسبة في كل من عينات الحروق والجروح بينما اقل نسبة (12.7%) 13 كانت من عزلات الاذن وسجلت فروق مهمة إحصائيا (P˂0.01) في كل منهما بين العزلات السريرية. وأظهرت مقاومة متعددة للمثسلين، البنسلين G، سيفوكسيتين اريثرومايسين أوكساسيلين، الكلورامفينيكول وتتراسايكلين في حين حساسة للفانكومايسين. . أيضا (%51.3)77عزلة P.aeruginosa ،(%80.50)62 منها ذات مقاومة متعددة للمضادات الحيوية شكلت أكثر من النصف (%59.8 and %51.6) على التوالي من النسبة في كل من عينات الحروق والجروح ، في حين أن اقل نسبة عزل كانت (%12.9)8 من عينات الأذن أيضا كانت الظروف المثلى لانتاج البكتريوسينات في مرق الصويا trypticase ومرق القلب الدماغ تستكمل مع مصدر (كاربوني ونايتروجيني واملاح ووالمنظفات والفيتامينات ) مع الرقم الهيدروجيني 7، في درجة حرارة 37 م5 لمدة 48 ساعة. وحجم اللقاح من %2 من المزروع البكتيري الذي يحتوي على 6×108 خلية /مل
تمت دراسة الفعالية التحللية المرسسين وار- بايوسيين ضد العزلات وأوضحت النتائج أنه يمتلك الفعالية الحالة للغشاء الخلوي عندما أنخفضت الامتصاصية الضوئية عند الطول الموجي 600 نانوميترمن 0.59 الى0.17 لبكتريا P.aeruginosa بعد ساعتين فقط من التعرض للبلانتريسين وبتركيز 320 وحدة/مل دليلاً على خروج الحامض النووي (DNA) من الخلايا نتيجة لتحللها.يتضح من هذه النتائج أن هدف المرسسين وار- بايوسيين هو الغشاء الخلوي
أظهرت الدراسة المعالجه الاصابات الجروح في جلد الفئران بعد تلويثها بعزلات MRSA و P.aeruginosa المقاومة حيث ظهرت الالتهابات وللانتفاخات في مناطق الجرح مع تقيحات في المناطق السطحية من الجلد ووجود تأثير تآزري لكل من البكتريوسينات النقية بعد أحداث إصابة تجريبية داخل الجسم الحي المعاملة إذ سجلت نتائج التقطيع النسيجي عودة النسيج إلى وضعه الطبيعي تحت هذه المعاملة.